cem多肽合成仪,多肽合成仪的操作方法 5
6、用Fmoc-磷酰酪氨酸合成含磷酰酪氨酸的肽段
所需试剂:Na-Fmoc-O-磷酰酪氨酸1g。
1)若用ABI多肽合成仪进行0.1mmol或0.的合成,使用0.-Tyr(PO3H2)-OH(1mmol)即可cem多肽合成仪,将Fmoc-Tyr(PO3H2)-OH装好备用。
2)结合Fmoc-Tyr(PO3H2)-OH的步骤与其他Fmoc氨基酸结合步骤,除了结合时间(见下一步)以外,基本相同(注意:ABI多肽合成仪利用HBTU/HOBT作为催化剂)。
3)需要增加Fmoc-Tyr(PO3H2)-OH的结合时间。例如,ABI公司的合成仪430A加入了较多步骤,如有必要可以进行过夜反应。
4)完成Fmoc-Tyr(PO3H2)-OH结合后,进行二氢茚三酮测试cem多肽合成仪,若无色,说明结合完全,若显蓝色,说明尚未完全结合。
5)在磷酰酪氨酸结合后或进行同步结合时,要增加氨基酸残基的反应时间(注意:在磷酰酪氨酸结合后进行氨基酸残基结合比较困难)。
6)由于磷酸基团未被保护,很有可能发生侧链反应,因此在磷酰酪氨酸上结合的氨基酸数目是有限制的(注意:磷酰酪氨酸上结合10个氨基酸的多肽已经成功合成)。